糖水偏愛實(shí)驗(yàn)(sucrose preference test)是檢測抑郁癥的一個(gè)典型癥狀快感缺失的經(jīng)典實(shí)驗(yàn),是利用嚙齒類動(dòng)物對甜味的偏好而設(shè)計(jì)一種檢測方法。動(dòng)物禁食一段時(shí)間后, 同時(shí)給予白水和低濃度蔗糖水,以動(dòng)物對蔗糖水的偏嗜度(蔗糖偏嗜度)為指標(biāo)檢測動(dòng)物是否出現(xiàn)快感缺失這一抑郁癥狀。
該實(shí)驗(yàn)在大鼠慢性應(yīng)激模型中應(yīng)用極為廣泛,大鼠慢性不可預(yù)知性應(yīng)激模型 的建立者Katz和大鼠慢性溫和應(yīng)激模型的建立者Willner 分別于1982年和1987年采用糖水實(shí)驗(yàn)檢測抑郁模型動(dòng)物是否出現(xiàn)快感缺失癥狀。此外,該實(shí)驗(yàn)為抗抑郁藥起效速率研究的主要行為學(xué)檢測方法之一。
實(shí)驗(yàn)材料
糖水偏好測試儀采用了動(dòng)物舒適且熟悉的居住飼養(yǎng)籠（homecage），如下圖示，飼養(yǎng)籠是透明聚碳酸酯材料，一側(cè)裝備了不銹鋼動(dòng)物食槽，另一側(cè)安裝配置了2個(gè)不銹鋼瓶嘴的飲水瓶，可輕松取下來換水和清洗，飲水瓶容量為50ml-100ml可選，標(biāo)配50ml。同時(shí)，飲水瓶上標(biāo)有刻度，方便實(shí)驗(yàn)員統(tǒng)計(jì)液體消耗量。靠近飲水瓶側(cè)下方鋪有不銹鋼底板，動(dòng)物舔水時(shí)底板與不銹鋼瓶嘴通過微弱的電流形成閉合回路，可動(dòng)態(tài)全程檢測動(dòng)物的舔水次數(shù)。
糖水偏好實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，XR-268 型，上海欣軟
糖水偏好測試儀根據(jù)用戶的需求，還可以設(shè)置飲水瓶口自動(dòng)門開關(guān)，增強(qiáng)飲水偏好選擇難度。同時(shí)，可選配外部接口模塊，實(shí)時(shí)與光遺傳、光纖記錄等第三方設(shè)備同步記錄打標(biāo)。
實(shí)驗(yàn)方法
大、小鼠糖水偏愛實(shí)驗(yàn)的操作方法上略有不同,對其分別進(jìn)行總結(jié)如下:
(1) 大鼠糖水偏愛實(shí)驗(yàn)：
訓(xùn)練期：動(dòng)物應(yīng)單籠飼養(yǎng),進(jìn)行48h的蔗糖飲水訓(xùn)練。前24h給予兩瓶 1% ~ 2%蔗糖水,后24h,一瓶給予1%~2%蔗糖水,另一瓶給予飲用純水(中途交換兩個(gè)水瓶位置)。大鼠禁食禁水14 ~ 23h后,進(jìn)行糖水偏愛指數(shù)的測定:測定 1 h 內(nèi)大鼠對兩瓶水的飲用量(g)。
(2) 小鼠糖水偏愛實(shí)驗(yàn)：
操作流程同大鼠。但在48h飲水訓(xùn)練時(shí),應(yīng)全程給予1% ~ 2%蔗糖水和飲用水(中途交換兩個(gè)水瓶位置)。訓(xùn)練期結(jié)束后,禁水(不禁食)9~16h,測定8~15h內(nèi)(中間宜交換兩瓶位置1次) 小鼠對兩瓶水的飲用量(g)。
評價(jià)指標(biāo)
應(yīng)采用蔗糖偏嗜度( sucrose preference)作為評價(jià)指標(biāo),蔗糖偏嗜度(%) = 蔗糖水飲用量/ (蔗糖水飲用量+飲用水飲用量)×100%。
抑郁行為判斷標(biāo)準(zhǔn)：蔗糖偏嗜度低于0. 4或者與對照組相比有顯著性減低(P< 0. 05)。
注意事項(xiàng)
1、應(yīng)定期交替放置兩個(gè)瓶子的位置，以消除側(cè)面或位置偏愛的可能性。
2、可以在一整天或選定的時(shí)間段內(nèi)測量蔗糖的偏愛。如果使用選定的時(shí)間段，則在整個(gè)動(dòng)物中保持一致是很重要的，因?yàn)橐归g節(jié)律會影響偏好行為。
3、可以用幾種方式來計(jì)算結(jié)果測量值，包括消耗的溶液總毫升數(shù)（甜味與不甜的比例）或每克體重消耗的蔗糖克數(shù)。雖然這兩個(gè)測量值通常在動(dòng)物模型中相關(guān)，但后者可能會與壓力和焦慮有關(guān)的飲食失調(diào)行為、體重減輕有關(guān)系。
4、參靠實(shí)驗(yàn)前2周內(nèi)動(dòng)物的飲水量數(shù)據(jù)，控制好糖水的配比濃度、液體量以及實(shí)驗(yàn)時(shí)長。
5、在小鼠和大鼠的品系之間，在蔗糖偏愛方面也存在一些差異，比如Wistar大鼠不是特別敏感。
6、嚙齒動(dòng)物在蔗糖偏愛方面的可能還有性別差異，比如Wistar Kyoto雄性大鼠的蔗糖偏愛率低于雌性。
7、實(shí)驗(yàn)之前，動(dòng)物單獨(dú)飼養(yǎng)通常建議48-72小時(shí)的適應(yīng)時(shí)間。
8、 大鼠或小鼠必須處于單籠條件下（即單獨(dú)的籠子中）才能進(jìn)行蔗糖偏愛測試。
9、實(shí)驗(yàn)測試的整個(gè)周期里，選擇蔗糖的品牌盡量保持一致，避免其他因素對結(jié)果造成影響。
10、評估糖水偏好測試（SPT）的實(shí)驗(yàn)指標(biāo)優(yōu)先考慮蔗糖偏嗜度( sucrose preference)，也就是蔗糖偏好比，而不是每只飲水瓶的攝入量
11、 糖水偏好測試過程中偶爾會存在飲水瓶漏水的現(xiàn)象，這種情況有可能是實(shí)驗(yàn)員操作失誤，有可能是飲水瓶位置放置不正確，也有可能是動(dòng)物舔水過程中無意泄漏的，這些現(xiàn)象很多時(shí)候可能會導(dǎo)致在規(guī)定時(shí)間內(nèi)獲取的動(dòng)物舔水?dāng)z入量差異不明顯（動(dòng)物單次飲水量本就很有限），這個(gè)時(shí)候用戶可以選擇糖水偏好測試儀的計(jì)算出的動(dòng)物舔水次數(shù)、飲水時(shí)間、舔水頻率等數(shù)據(jù)來參考統(tǒng)計(jì)，或許是另一條評估的好思路。
小tips：
① 在建立抑郁模型前后均做一次該實(shí)驗(yàn)，效果更為明顯；
② 在訓(xùn)練過程中12h后調(diào)換蔗糖水瓶和純水水瓶的位置，避免水瓶位置對實(shí)驗(yàn)的干擾
③ 更加重要的是在正常實(shí)驗(yàn)前一定要檢查好水瓶是否明顯漏水，以及一定要旋緊壓緊瓶蓋，實(shí)驗(yàn)周期84h。
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